Einsatz und Nutzen

Die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) ist ein etabliertes analytisches Verfahren zur Trennung, Identifizierung und Quantifizierung chemischer Substanzen in flüssigen Proben. Mit der HPLC lassen sich auch thermisch instabile oder nicht-flüchtige Verbindungen analysieren, die für Gaschromatographie nicht geeignet sind. Typische Anwendungsfelder sind die chemische Forschung, Pharmazeutische Analytik, Umweltüberwachung und Lebensmittelprüfung. Neben analytischen Anwendungen kann HPLC ebenfalls für die präparative Trennung eingesetzt werden, etwa in der Wirkstoffisolierung.

Auswahlkriterien

Die Auswahl eines geeigneten HPLC-Systems richtet sich nach Eigenschaften der zu analysierenden Substanzen, etwa Polarität, Molekülgröße und Konzentration, sowie nach der erforderlichen Trennschärfe und Nachweisgrenze. Weitere wichtige Faktoren sind die Art der stationären Phase (Säule), die Zusammensetzung des mobilen Phasen-Gemischs sowie der Detektionstyp. Auch Benutzerfreundlichkeit, Durchsatz und Wartungsaufwand spielen eine Rolle bei der Beschaffung.

Varianten und Messprinzipien

HPLC beruht auf der Verteilung der Probenbestandteile zwischen mobiler Phase (flüssig) und stationärer Phase (Säule). Unterschiedliche Trennprinzipien wie Umkehrphasen-, Normalphasen- oder Ionenaustauschchromatographie sind je nach Anwendungsfall anwendbar. Weiterentwicklungen umfassen UHPLC (Ultra-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie) mit höherem Druck und besserer Trennleistung sowie Kopplungen mit Massenspektrometrie (LC/MS) zur erweiterten Stoffidentifikation.

Kalibrierung und Wartung

Für verlässliche Messergebnisse ist eine regelmäßige Kalibrierung anhand bekannter Standards erforderlich. Wartungsarbeiten umfassen den Austausch von Säulen sowie der mobilen Phase, Reinigung oder Wechsel von Filterelementen und Dichtungen. Ein korrekt gepflegtes System garantiert stabile Trennleistung und verlängert die Lebensdauer der Gerätekomponenten.

Grenzen der Anwendung

HPLC ist nicht geeignet für die Analyse gasförmiger oder stark flüchtiger Substanzen. Die Methode erfordert oft aufwändige Probenvorbereitung, je nach Komplexität der Matrix. Zudem sind die Investitionskosten und der laufende Wartungsaufwand höher als bei einfacheren Trennmethoden. Für sehr schnelle Analysen oder extrem hohe Trennauflösungen kommen alternativ auch UHPLC oder Kopplungen mit anderen Detektionsmethoden in Betracht.

Suchbegriffe und verwandte Begriffe

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