Einsatz und Nutzen

UV/VIS Spektrophotometer ermöglichen die Analyse von Proben durch Messung der Lichtabsorption im ultravioletten (ca. 190–380 nm) und sichtbaren (ca. 380–760 nm) Spektralbereich. Typische Anwendungen umfassen biochemische Analysen wie die Bestimmung der Reinheit von Nukleinsäuren und Proteinen sowie mikrobiologische Messungen, etwa die Trübung von Bakterienkulturen. Das Spektrophotometer liefert quantitative Daten zur Konzentration und Qualität der analysierten Substanz.

Auswahlkriterien

Die Wahl eines UV/VIS Spektrophotometers richtet sich nach dem Messprinzip (Einstrahl, Zweistrahl oder geteilte Strahlenoptik), dem benötigten Wellenlängenbereich und der erforderlichen Messgenauigkeit. Wichtige Parameter sind zudem die Applikationsmöglichkeiten, Bedienkomfort, Kompatibilität mit Probengefäßen (z.B. Küvetten) sowie Schnittstellen für Datenexport und -analyse. Für präzise und reproduzierbare Messergebnisse ist auch die Qualität der optischen Komponenten entscheidend.

Varianten und Messprinzipien

Einstrahl-Spektrophotometer messen die Intensität vor und nach Probeneinwurf über denselben Strahlengang, wohingegen Zweistrahl-Geräte gleichzeitig Referenz- und Probe messen, was Fehler durch Schwankungen der Lichtquelle reduziert. Geräte mit geteilten Strahlenoptiken ermöglichen ebenfalls den Vergleich zweier Strahlen parallel zur Kompensation von Störgrößen. Weiterhin unterscheiden sich Modelle in der Art der Detektoren und der Softwarefunktionalität.

Kalibrierung und Wartung

Regelmäßige Kalibrierung und Validierung sind notwendig, um zuverlässige Messergebnisse sicherzustellen. Dabei können Standardlösungen oder spektrale Kalibrierstandards eingesetzt werden. Wartungsarbeiten umfassen die Reinigung der optischen Komponenten und das Prüfen der Lichtquelle. Sorgfältige Pflege trägt zur Verlängerung der Lebensdauer und zur Erhaltung der Messqualität bei.

Grenzen der Anwendung

UV/VIS Spektrophotometer sind für transparente bis leicht trübe Proben geeignet. Stark streuende, opake oder feststoffhaltige Proben können die Messgenauigkeit einschränken. Zudem sind sie auf die Absorption im UV- und sichtbaren Bereich beschränkt und erfassen keine Informationen außerhalb dieses Spektralbereichs. Für fluoreszenzbasierte oder infrarotspektroskopische Anforderungen sind spezialisierte Geräte erforderlich.

Suchbegriffe und verwandte Begriffe

Synonyme und häufig verwendete Begriffe umfassen UV-Vis Spektralphotometer, UV-VIS Spektrometer, Ultraviolett/Visible Spektrophotometer, UV/VIS Analysengerät, Absorptionsmessung, Lichtintensität, Trübungsmessung, Proteinbestimmung und Bakterienkultur.