Utilisation et avantages

Les spectrophotomètres UV/VIS permettent d’analyser des échantillons par mesure de l’absorption de la lumière dans les domaines du rayonnement ultraviolet (env. 190–380 nm) et visible (env. 380–760 nm). Les applications typiques incluent l’analyse biochimique, comme la détermination de la pureté des acides nucléiques et des protéines, ainsi que des mesures microbiologiques, par exemple la turbidité des cultures bactériennes. Le spectrophotomètre fournit des données quantitatives sur la concentration et la qualité de la substance analysée.

Critères de sélection

Le choix d’un spectrophotomètre UV/VIS dépend du principe de mesure (faisceau unique, double faisceau ou optique à faisceau partagé), de la plage de longueurs d’onde nécessaire et de la précision souhaitée. D’autres critères importants sont les possibilités d’application, la facilité d’utilisation, la compatibilité avec les contenants d’échantillons (par exemple, cuves) ainsi que les interfaces pour l’export et l’analyse des données. La qualité des composants optiques est également déterminante pour des résultats précis et reproductibles.

Variantes et principes de mesure

Les spectrophotomètres à faisceau unique mesurent l’intensité avant et après le passage de l’échantillon dans le même trajet optique, tandis que les appareils à double faisceau mesurent simultanément une référence et un échantillon afin de réduire les erreurs dues aux variations de la source lumineuse. Les dispositifs à optique à faisceau partagé permettent également une comparaison parallèle de deux faisceaux pour compenser les interférences. Les modèles diffèrent également par les types de détecteurs et les fonctions logicielles.

Étalonnage et maintenance

Un étalonnage et une validation réguliers sont nécessaires pour garantir des résultats fiables. Des solutions standards ou des standards d’étalonnage spectral peuvent être utilisés à cet effet. La maintenance inclut le nettoyage des composants optiques et la vérification de la source lumineuse. Un entretien soigneux prolonge la durée de vie de l’instrument et maintient la qualité des mesures.

Limites d’application

Les spectrophotomètres UV/VIS conviennent aux échantillons transparents à légèrement troubles. Les échantillons fortement diffusants, opaques ou contenant des solides peuvent limiter la précision des mesures. De plus, ils ne détectent que l’absorption dans le domaine UV et visible, et n’offrent aucune information au-delà de ce spectre. Les applications nécessitant la fluorescence ou la spectroscopie infrarouge requièrent des instruments spécialisés.

Termes de recherche et synonymes

Les synonymes et termes courants incluent spectrophotomètre UV-Vis, spectromètre UV-VIS, spectrophotomètre ultraviolet/visible, analyseur UV/VIS, mesure d’absorption, intensité lumineuse, mesure de turbidité, dosage de protéines et culture bactérienne.